La Biblioteca si e' sviluppata attorno all'antica biblioteca voluta da Malatesta Novello, signore di Cesena nel XV secolo, e realizzata dall'architetto Matteo Nuti in forma di aula basilicale a tre navate. Terminata nel 1452 e' rimasta intatta in ogni sua parte. Conserva manoscritti dei secoli IX-XV e volumi a stampa dei secoli XV-XVIII.
Nel salone che si apre di fronte all'aula del Nuti si conserva la Biblioteca Piana, gia' di papa Pio VII Chiaramonti, ora di proprieta' statale ricca di oltre cinquemila volumi a stampa e di un centinaio di manoscritti.
Nella stessa sala sono esposti 14 corali miniati del XV secolo, sette dei quali furono commissionati dal cardinale Bessarione e provengono dal convento dell'Osservanza; i restanti appartengono all'Archivio capitolare della Cattedrale di Cesena e sono in deposito presso la Malatestiana: vennero realizzati tra il 1480 e il 1495 da Enrico di Amsterdam su incarico del Vescovo Giovanni Venturelli e del Capitolo dei canonici. Il patrimonio della Biblioteca si e' costituito originariamente con i fondi librari provenienti dalle Corporazioni religiose soppresse. Tra l'800 e il '900 la Biblioteca si e' arricchita, tramite donazioni di importanti fondi librari.
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